Eva Garcia^1,2, Daniela Figueira ^1,2, Aitana Ares ^1,2, Sara Rodrigues ^1,2, Joana Costa^1,2

1. Universidade de Coimbra, Centro de Ecologia Funcional, Departamento de Ciências da Vida, Calçada Martim de Freitas, 3000-456 Coimbra, Portugal.
2. Laboratório de Fitossanidade, Instituto Pedro Nunes, 3030-199 Coimbra, Portugal

A importância da fileira do kiwi em Portugal tem aumentado ao longo dos últimos anos, atingindo em 2020 uma produção de 45.818 toneladas. No entanto, a sustentabilidade da produção encontra-se ameaçada por vários fatores, incluindo a presença de doenças que podem condicionar a produção e, em casos mais severos, podem causar a morte das plantas. Os principais agentes causais de doenças nesta cultura são a Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa – classificado como organismo nocivo de quarentena), P. s. pv. syringae e P. viridiflava. Os principais objetivos deste trabalho foram a identificação de biopesticidas microbianos para controlo das bactérias fitopatogénicas acima referidas e/ou de bactérias promotoras do crescimento das plantas (BPCP) isoladas de populações naturalmente presentes na filosfera de pomares de kiwi nacionais. Foi compilada uma coleção de cultura de bactérias endófitas e epífitas isoladas de cinco pomares localizados nas principais zonas produtoras de kiwi (Viana do Castelo, Guimarães, Albergaria-a-Nova e Montemor-o-Velho), contabilizando um total de 2331 estirpes. Destas, 975 apresentaram resultado negativo na análise molecular para a deteção de Psa. A sua identificação preliminar foi realizada com recurso à análise das sequências parciais dos genes 16S rRNA, gapA e rpoD, permitindo concluir que a maioria das estirpes pertencia ao género Pseudomonas e em menor número aos géneros Rosenbergiella e Sphingomonas. Entre os isolados do género Pseudomonas, 33 foram identificados como P. viridiflava e 43 como P. s. pv. syringae. Esta análise permitiu ainda selecionar um pomar para estudos futuros onde não foi detetada a presença de Psa. Uma abordagem semelhante foi aplicada ao pomar livre de Psa, onde foram selecionadas 240 estirpes geneticamente distintas com base em análise do polimorfismo dos fragmentos de DNA. Destas, 151 foram selecionadas para a avaliação da sua atividade antagonista in vitro contra estirpes de Psa, P. s. pv. syringae e P. viridiflava isoladas em Portugal e de referência. Verificou-se que 22 dos 151 isolados apresentaram atividade antagonista contra a Psa de referência italiana, 17 contra Psa isolada em Portugal, 5 contra P. viridiflava e 3 contra P. s. pv. syringae. As principais características das bactérias promotoras de crescimento das plantas foram avaliadas in vitro para todos os 151 isolados, nomeadamente a solubilização de fosfato, produção de sideróforos e amónia. Destes, 28 apresentaram capacidade de solubilizar fosfato, 39 de produzir amónia e 54 de produzir sideróforos. Considerando estes resultados como promissores, a sequência do genoma foi determinada para os isolados com atividade antagonista e promotores de crescimento com o objetivo de ter a sua identificação completa e identificar os mecanismos subjacentes a estas características. Após a conclusão desta análise, serão selecionadas as estirpes mais relevantes para o desenvolvimento de formulações para aplicações biológicas em ensaios in vivo para o controlo de doenças.

Palavras-Chave: Pseudomonas syringae pv. actinidiae; Pseudomonas syringae pv. syringae; Pseudomonas viridiflava; atividade antagonista; promotores de crescimento.

Financiamento: Trabalho realizado no âmbito da Ação 1.1 Grupos Operacionais “I9K – InovKiwi – Desenvolvimento de estratégias que visem a sustentabilidade da fileira do kiwi através da criação de um produto de valor acrescentado” promovida pelo PDR2020 e co-financiada pelo FEADER, no âmbito do Portugal 2020. Aitana Ares agradece o financiamento do Projecto CULTIVAR (CENTRO-01-0145-FEDER-000020), co-financiado por o Programa Operacional Regional Centro 2020, Portugal 2020, e a União Europeia, através do Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER).